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第一节 抗肿瘤作用
灵芝对实验动物的移植性肿瘤具有显著的抑制作用。
Sasaki等(1971)发现,从树舌子实体中分离出的多糖成分G—Z对小鼠肉瘤S180有抑制作用,抑制率为54.7%。随后,Ohtsuka等(1976)、Hitoshi等(1977)、佐藤等(1977)亦先后报告,铁杉灵芝(Ganoderma tsugae)和岛灵芝(Ganoderma boninense)菌丝体所含多糖、灵芝中提取出的四种含少量蛋白质的多糖、赤芝热水提取物对小鼠肉瘤S180均有显著抑制作用。Maruyama等报告,腹腔注射或灌胃赤芝水提物对小鼠肉瘤S180均有抗种瘤作用,而醇溶部分无效。分子量大于10 000者有效,小于10 000者无效。Kim等(1981)也报告,从朝鲜产灵芝中提取的一种由4种单糖和18种氨基酸组成的多糖和蛋白质的混合物可抑制小鼠肉瘤S180的生长,抑瘤率达87.6%,其中三分之一小鼠的肿瘤完全消退。
Kang等(1981)发现,从灵芝菌丝体中提取出的一种蛋白多糖不仅可抑制小鼠肉瘤S180生长,而且腹腔注射5d后,经羊红细胞(SRBC)免疫的小鼠脾脏空斑形成细胞(PFC)数较对照组显著增加,表明此多糖可提高荷瘤小鼠的免疫功能。
高斌等(1989)用从树舌子实体中提取的树舌多糖研究了其抑瘤作用和机制,结果发现,树舌多糖可降低小鼠荷瘤率,减轻瘤重。并认为其抑瘤作用可能与增强体内自然杀伤细胞(NK)活性和促进T辅助细胞Th)产生白细胞介素质2(IL-2)、γ-干扰素有关。
李旭生等证明,灵芝菌丝体提取物(GLP)对C3H小鼠的肌纤维恶性肿瘤有明显的抑瘤作用,而且对肺部转移病灶亦有抑制作用。体外试验时,GLP对P3HR-1细胞与脑膜瘤细胞亦有抑制作用。随后,他们进一步证明,灵芝菌丝体酒精萃取的不溶性物(GL-AI)可能增强正常小鼠和荷瘤小鼠脾脏自然杀伤细胞(NK)的杀伤活性。且无论口服、腹腔注射或静脉注射均有效。腹腔注射40mg/kg有GL-AI15h后即显著增强自然杀伤细胞的杀伤活性,48h达高峰,作用可维持96h。GL-AI在增强自然杀伤细胞的活性同时,亦促进小鼠干扰素的产生。
蔡宗统(1991)指出,三种台湾产灵芝(无柄灵芝、古梅灵芝、猴板凳)水提液经灌胃给药后,在预防癌症发生模式、癌症初期治疗模式、癌症后期治疗模式中,均有抑瘤效果。
Toth等(1983)报告,从赤芝菌丝体中提取的六种三萜类细胞毒物质(ganoderic acid U,V,W,X,Z),在体外明显抑制肝肉瘤(HTC)细胞生长。
以上结果证明灵芝具有抗肿瘤作用,而灵芝多糖是其抗肿瘤作用的主要有效成分,其抗肿瘤作用机制可能是宿主中介性的,即通过增强机体免疫功能而实现。
第二节 免疫调节作用
一、提高机体的非特异性免疫功能 我们曾观察了从灵芝子实体中提取的灵芝液和灵芝多糖D6对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活力的影响。结果证明,灵芝液和灵芝多糖D6均能明显提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红血球的能力,吞噬百分率和吞噬指数均较对照组为高。我们还发现,从松杉树芝(铁杉灵芝)子实体和菌丝体中提取的多糖能恢复小鼠因注射氢化可的松而降低的静脉注射的碳粒廓清速率。
顾立刚等(1990)的实验证明,从薄盖灵芝菌丝体提取制成的注射液(简称薄芝液)与小鼠腹腔巨噬细胞在体外培养24h后,在剂量适宜时(5~20μl/ml)可增加巨噬细胞对中性红的吞噬功能,并增加巨噬细胞内溶菌酶的含量。此外,薄芝液还能协同LPS增强巨噬细胞分泌白细胞介素1(IL-1)的能力。
高斌等(1989)亦证明,树舌多糖在体外亦能促使巨噬细胞分泌IL-1样物质。
第二节 免疫调节作用
一、提高机体的非特异性免疫功能 我们曾观察了从灵芝子实体中提取的灵芝液和灵芝多糖D6对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活力的影响。结果证明,灵芝液和灵芝多糖D6均能明显提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红血球的能力,吞噬百分率和吞噬指数均较对照组为高。我们还发现,从松杉树芝(铁杉灵芝)子实体和菌丝体中提取的多糖能恢复小鼠因注射氢化可的松而降低的静脉注射的碳粒廓清速率。
顾立刚等(1990)的实验证明,从薄盖灵芝菌丝体提取制成的注射液(简称薄芝液)与小鼠腹腔巨噬细胞在体外培养24h后,在剂量适宜时(5~20μl/ml)可增加巨噬细胞对中性红的吞噬功能,并增加巨噬细胞内溶菌酶的含量。此外,薄芝液还能协同LPS增强巨噬细胞分泌白细胞介素1(IL-1)的能力。
高斌等(1989)亦证明,树舌多糖在体外亦能促使巨噬细胞分泌IL-1样物质。
二、增强机体体液免疫功能
我们曾以羊红细胞(SRBC)诱导的小鼠空斑形成细胞(PFC)反应为指标,观察几种灵芝多糖对正常小鼠和各种诱因所致免疫功能抑制小鼠的体液免疫功能的影响。灵芝多糖BN3C(5mg/kg)连续腹腔注射5d,能显著促进PFC反应。14月龄小鼠的PFC反应较3月龄小鼠明显降低,灵芝多糖BN3A、BN3B和BN3C(5mg/kg)连续腹腔注射5d,可使14月龄小鼠降低的PFC反应明显恢复(表7-1)。
表7-1 灵芝多糖BN3A、BN3B和BN3C对14月龄
小鼠空斑形成细胞(PFC)反应的影响
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鼠龄
(月) |
药物 |
剂量
mg/(kg·d),ip |
PFC×106脾细胞 |
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3 |
对照 |
- |
2061±309 |
|
14 |
对照 |
- |
864±386+++ |
|
14 |
BN3A |
5×5 |
1957±392*** |
|
14 |
BN3B |
5×5 |
1792±577** |
|
14 |
BN3C |
5×5 |
1405±336* |
x - ±s,n=6,+++P<0.001与3月龄对照比较,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001与14月龄对照比较。
松杉树芝子实体多糖(10~100mg/kg)连续灌胃给药4d可显著增加小鼠抗SRBC PFC数目;在注射环磷酰胺引起免疫功能抑制的小鼠,连续灌胃松杉树芝子实体多糖(100mg/kg,200mg/kg)4d,能使降低的PFC反应部分恢复;强迫小鼠每日在冷水中游泳8~10d,因应激可引起小鼠免疫功能显著降低,如在应激同时给予松杉树芝子实体多糖则可完全对抗应激所致PFC反应降低(表7-2)。从松杉树芝菌丝体和发酵液中所获多糖亦有类似作用。
表7-2 松杉树芝子实体多糖对应激所致免疫功能抑制
小鼠的空斑形成细胞(PFC)反应的影响
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组别 |
剂量
mg/(kg·d),ip |
鼠数 |
PFC×106脾细胞
x - ±s |
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对照 |
- |
7 |
1222±283 |
|
应激对照 |
- |
7 |
798±121** |
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松杉树芝多糖+应激 |
25×8 |
6 |
1356±440++ |
|
松杉树芝多糖+应激 |
50×8 |
6 |
1396±349++ |
|
松杉树芝多糖+应激 |
100×8 |
6 |
1416±518++ |
**P<0.01与对照组比较,++P<0.01与应激对照组比较。
我们还发现,每日给小鼠腹腔注射灵芝多糖GL-B(25~100mg/kg),共4d,可明显增强小鼠脾细胞对LPS刺激的增殖反应。当GL-B为100mg/kg时,脾细胞增殖反应较对照组增加84.8%。结果表明,GL-B可增强B淋巴细胞对LPS刺激的敏感性。
与多糖成分不同,Kino等(1991)报告,当小鼠用乙肝表面抗原(HBsAg)1μg/只免疫后,第7d开始腹腔注射灵芝蛋白LZ-812mg/kg每周两次,直至第28d可抑制抗HBsAg抗体的产生。
三、增强机体细胞免疫功能
Nakashima等(1979)观察了树舌多糖对细胞免疫反应的影响。给ddy/s小鼠皮下注射甲基化的细胞α-淀粉酶和不完全的Freund's佐剂(M-BaA-IFA)后,仅产生微弱的足爪肿胀反应;但注射甲基化细菌α-淀粉酶和完全的Freund's佐剂(M-BaA-CFA)则引起明显的足爪肿胀反应。预先给小鼠腹腔注射树舌多糖30mg/kg,则能显著增加(M-BaA-IFA)引起的这种迟发型过敏反应,使其反应程度可达M-BaA-CFA所致程度。但剂量增至60 mg/kg时,这种增强作用反减弱。树舌多糖增强M-BaA-IFA诱发的迟发型过敏反应是由于激活非特异性的有扩大细胞免疫反应的T细胞(amplifier T-cells)所致。 |